Бактериологическое исследование молока С/Х животных на грамм+ и грамм- микрофлору

Описание исследования

Мастит у дойного скота - очень актуальная проблема в молочной промышленности. Мастит имеет широкое распространение и наносит огромный экономический ущерб производителям молока за счет его недополучения и снижения качества, преждевременной выбраковки коров, заболеваемости новорожденных телят и затрат на лечение.
Среди высокопродуктивных молочных коров за период лактации маститом переболевают 72,1  % животных. Из них 14,8 % переболевают два и более раза. Соотношение клинически выраженного мастита и субклинического составляет 1:4,7. С увеличением молочной продуктивности с 4-5 тыс.кг до 6 тыс.кг заболеваемость увеличивается в 1,7 раза, до 7 тыс.кг - в 2,5 раза и свыше 7 тыс.кг - в 4 раза.
Терапия больных субклиническим маститом лактирующих коров антимикробными препаратами способствует снижению развития у них родовых и послеродовых болезней на 7,7 - 14,3 %, сокращению продолжительности бесплодия на 1,9 - 24,7 дня, индекса осеменения на 0,1 - 0,7 и развития мастита после отела в 2,0-2,1 раза.
Терапия больных клинически выраженным маститом высокопродуктивных коров антимикробными препаратами предупреждает развитие родовых и послеродовых болезней у 21,4 - 33,3 % животных.
Для снижения заболеваемости высокопродуктивных молочных коров маститом, родовыми и послеродовыми болезнями, в период лактации необходимо проводить регулярную диагностику патологического процесса в молочной железе и всех больных животных подвергать адекватной антимикробной терапии.
Большинство случаев мастита имеет инфекционное происхождение, то есть вызывается микроорганизмами. Чаще всего это бактерии, но иногда могут быть микроскопические грибы, вирусы.
Мастит могут вызывать более чем 140 видов различных микроорганизмов. Наиболее часто встречаемые из них можно обьединить в группы: контагиозные (заразные), условнопатогенные микробы организма животного, микроорганизмы внешней среды. Данные микроорганизмы вызывают воспаление молочной железы как самостоятельно, так и в ассоциации друг с другом.
Контагиозная микрофлора обладает высокой патогенностью и вызывает значительный рост соматических клеток. Такая форма заболевания имеет ярко выраженные клинические признаки. Главный резервуар возбудителей - молоко от больного животного. Заражение происходит через молочный канал, раны сосков и вымени, через инфицированные руки рабочего персонала, молочное оборудование, предметы гигиены и ухода. Часто заражение происходит гематогенным путем из других органов и тканей животного. Предрасполагающим фактором к заражению является неполное додаивание или, наоборот, передои, скачки вакуума в системе доения, изношенная сосковая резина, грязные и стиранные салфетки, которыми обрабатываются соски животного до и после доения.
Streptococcus agalactiae - вызывает мастит тяжелой степени, поражая чаще молочные каналы нижней части вымени, бысто там размножается, вызывая поражение слизистой оболочки цистерны и молочных ходов с разрушением клеток эпителия. Клинический стрептококковый мастит проявляется снижением удоя, водянистым молоком, отеком и повышением температуры вымени.
Staphylococcus aureus - поражает более глубокие ткани вымени и провоцирует хроническое воспаление при высоком показателе соматических клеток. Пораженные четверти вымени отечны, молоко при сдаивании первых струек содержит хлопья. В паренхиме образуются микроабсцессы. Плотность молока у таких животных может варьироваться от легкой водянистости с небольшим количеством хлопьев до сильной водянистости с обилием желтых хлопьев.
Стафилококковые маститы трудно поддаются лечению антибиотиками, так как рубцы препятствуют распределению антибиотика в зараженной части вымени.
Такие бактерии, как Staphylococcus aureus и Streptococcus agalactiae обладают хорошей адгезией со слизистой оболочкой молочных каналов, что усложняет процесс лечения и выздоровления животного.
К малопатогенным микроорганизмам относят Corynebacterium bovis и Mycoplasma bovis.
Corynebacterium bovis - вызывает мастит, протекающий в легкой форме, и легко излечивается.
Маститы, вызванные Mycoplasma bovis, имеют бысрое распространение в стаде, снижают удои, при лечении отсутствует эффект. Данный возбудитель диагностируется только методом ПЦР.
Условнопатогенная или нормальная микрофлора животного, микроорганизмы внешней среды вызывают маститы при снижении естественной резистентности организма, воздействии стрессовых факторов.
Большинство маститов вызывается стрептококками, стафилококками и колиформными бактериями, такими как Escherichia coli, Streptococcus spp., Streptococcus uberis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus chromogenes, Staphylococcus hyicus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus simulans, Staphylococcus teameri. Естественная среда их обитания - здоровая кожа сосков, слизистая влагалища, миналины животных и руки доярок.
К микроорганизмам внешней среды относятся колиформные микробы, энтерококки и стафилококки. Колиформные - Escherichia coli, Klebsiella pneumonia, Klebsiella oxytoca, энтерококки - Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium,
стафилококки - Staphylococcus xylosus, Staphylococcus sciuri. Доля таких маститов составляет менее 5 %.
Мастит может быть вызван Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка), дрожжеподобными грибами, мицелиальными грибами. Обычно случаи заболевания, вызванные данными инфекционными агентами редки.

Подготовка к исследованию

ВАЖНО: Стоимость каждого микробиологического исследования подразумевает бактериологический посев из ОДНОГО места/органа, отобранный в один коллектор с транспортной средой/контейнер/шприц. Требования к отбору материала: 1.Материал необходимо брать непосредственно из очага поражений. 2. Отбирают материал следует до применения антибактериальной терапии. Либо спустя 14 дней после проведения антибиотикотерапии. 3. Обеспечение условий, исключающих контаминацию их за счет смежных областей кожи, других органов и т. д. 4.При взятии материала необходимо соблюдать правила личной безопасности и асептику. Кожу молочной железы необходимо обмыть теплой водой с мылом, затем расствором антисептика., протереть насухо. Отбор проводить в одноразовых медицинских перчатках. 5. В исследуемую пробу сдаивают среднюю и последнюю порцию молока. При наличии в молоке гнойного содержимого, крови, слизи и др. , их необходимо включить в исследуемую пробу. 6. Время между взятием материала и его исследованием должно быть максимально коротким. 7. Материал, подлежащий бак.исследованию, собирают в специализированные стерильные контейнеры, поставляемые лабораторией. 8. Количество материала должно быть достаточным для проведения исследования : 9. Молоко должно быть доставлено в лабораторию в течение 2-х часов после сбора при условии охлаждения (+4-+8 С)

Требование к биоматериалу

Молоко должно быть доставлено в лабораторию в течение 2-х часов после сбора при условии охлаждения (+4-+8 С) Лаборатория рекомендует отбирать материал из каждой доли вымени в отдельную тару. ОДНА ПРОБА/ОДНО ИССЛЕДОВАНИЕ. молоко (в стерильный флакон, одноразовый шприц), в количестве: 2 – 5 мл от мелких животных массой до 10 кг. 5 – 10 мл от средних животных массой от 10 до 30 кг 10 – 15 мл от крупных животных массой от 30 кг и выше. Внимание ! Исследование молока для С/Х животных рекомендуется проводить в комплексе (коды исследований 714 +726+717).

Диагностическая информация

В ходе исследования устанавливается наличие или отсутствие жизнеспособных микрорганизмов в исследуемом материале. При наличии в материале не патогенных, условно патогенных либо патогенных бактерий проводится их идентификация (установление родовой, видовой (если это возможно) принадлежности), дается определение точного количества микроорганизмов в единице объема материала, определяется чувствительность выделенного микроорганизма к антибактериальным препаратам. Выделяемые возбудители: Бактерии рода Staphylococcus (Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus и др), Streptococcus ( искл. Streptococcus agalactiae - определен отдельный код исследования ), бактерии сем-ва Enterobacteriacea (Escherichia coli, Klebsiella oxytoca, Klebsiella pneumoniae, Serratiae marcescens, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Citrobacter koseri и др), не ферментирующие грамотрицательные микроорганизмы (Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка) и др)), Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Trueperella pyogenes. Чувствительность выделенных бактерий определяется к следующему списку препаратов: Оксациллин 10 мкг, Цефотаксим (клафоран, тарцефоксим) 30мкг, Гентамицин (герамицин, генцин) 10мкг, Доксициклин (вибрамицин, доксилан, довицин)30мкг, Левомицетин(хлорамфеникол) 30мкг, Линкомицин (линкоцин, нелорен) 15мкг, Имипенем (тиенам, примаксин)10мкг, Меропенем (меронем) 10мкг, Офлоксацин (таривид, заноцин) 10мкг, Цефтазидим (фортум, тазицеф) 30мкг, Ципрофлоксацин (ципробай, ципролет) 5 мкг, Ампициллин (ампицид, амплитал, росциллин) 10мкг, Амоксициллин (кламоксил, амоксил, флемоксин) 20мкг, Амоксициллин – клавунат (синулокс, амоксиклав, аугментин)20/10мкг, Рифампицин (бенемицин, рифадин, тубоцин) 5мкг, Цефуроксим (аксетин, кетоцеф)30мкг, Цефазолин (кефзол, анцеф, цефаприм, прозолин) 30мкг, Цефалексин (оспексин, пролексин, цефаклен) 30мкг, Левофлоксацин (таваник) 5 мкг, Цефтриаксон 30мкг, Энрофлоксацин (байтрил, энрофлон, карифлокс, энроксил, энрофлокс, энробиофлокс) 10мкг. Для исследования чувствительности выделенных микроорганизмов к антимикробным препаратам, лаборатория рекомендует дополнительно проводить исследования по коду : 705 - ОЧА к дополнительному антибиотику (принести антибиотик) 750 - ОЧА расширенный список антибиотиков (на сайте)